在我國，聽力殘疾占各類殘疾人總數(shù)24.16%，僅次于肢體殘疾居第二位，聽力缺陷給家庭和社會帶來了沉重的經(jīng)濟和精神負擔(dān)。50%以上的先天性耳聾是由遺傳性因素導(dǎo)致的，是醫(yī)學(xué)界和遺傳學(xué)界較難攻克的頑疾，其預(yù)防比治療更有價值。正常人群中耳聾基因突變攜帶率高達6.3%，90%的聾兒由聽力正常的父母所生。三級篩查可大幅度減少耳聾缺陷兒的發(fā)生，一是孕前篩查，對篩查出的攜帶耳聾基因突變的夫婦提供遺傳咨詢，二是孕期即產(chǎn)前篩查與診斷，阻止較大比例的先天性隱性遺傳性耳聾的出生，三是新生兒篩查，預(yù)防避免耳聾發(fā)生或通過及時治療延緩聽力下降。

中國人群中最常見的遺傳性耳聾基因是GJB2、SLC26A4、rRNA和GJB34，其引起的疾病及檢測意義如下表：

表1 中國人群4個常見遺傳性耳聾基因

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耳聾基因篩查檢測，于國家可以節(jié)省財政支出，提高出生缺陷防治水平，同時推進計生、衛(wèi)生服務(wù)水平，具有巨大的社會意義。于醫(yī)院可以積累數(shù)據(jù)，分析耳聾基因在當(dāng)?shù)氐牧餍胁W(xué)分布，發(fā)現(xiàn)藥物敏感性耳聾和遲發(fā)性耳聾個體，減少漏診率提高診斷效率。于家庭可以實現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育，在最佳治療時機早篩查早診斷早干預(yù)，實現(xiàn)聾而不啞。因此，耳聾基因篩查檢測，尤其是新生兒篩查，具有巨大的經(jīng)濟效益和社會效益。目前國內(nèi)很多省市都免費開展了針對新生兒的聽力篩查和耳聾基因的聯(lián)合檢測項目。

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圖1 深圳市新生兒聽力與遺傳性耳聾基因聯(lián)合篩查流程圖

注：深圳市標(biāo)準(zhǔn)化指導(dǎo)性技術(shù)文件(SZDB/Z122—2015)

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婚育指導(dǎo)：所有婚齡青年、有聽障家族史人群、聽障人群

產(chǎn)前篩查：孕期的夫妻、有聽障家族史人群、聽障人群

新生兒篩查：新生兒，物理聽力篩查未通過兒、聽力損傷兒

表2 遺傳性耳聾基因檢測樣本類型

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兒童保健科、產(chǎn)科、產(chǎn)前遺傳咨詢及診斷中心、耳聾分子診斷中心等

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目前，遺傳性耳聾基因臨床診斷主要有核酸質(zhì)譜法、PCR法相關(guān)方法、NGS測序法及基因芯片法。基因芯片法是最早在臨床推廣的方法，但成本相對較高。即使集合一批樣品進行檢測可以在一定程度降低成本，但又會限制通量的靈活性，延長檢測周期，NGS測序同樣存在此問題，所以基因芯片法和NGS測序法僅適合樣品量檢測非常大的檢測中心使用。以ARMS-PCR和HRM-PCR為代表的新一代PCR技術(shù)檢測周期快，但受限于技術(shù)原理目前臨床的試劑盒僅能針對幾個位點進行檢測，臨床指導(dǎo)性大打折扣。而核酸質(zhì)譜方法一次可以檢測20多個位點，臨床指導(dǎo)意義大；而且不需要湊樣通量靈活，可以有效保證檢測周期；此外，核酸質(zhì)譜法使用常規(guī)PCR試劑，將多重靶標(biāo)集中到一個反應(yīng)，無需熒光、探針等，單位點檢測成本低，是遺傳性耳聾基因檢測的最佳方案。

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融智生物基于QuanNUA核酸質(zhì)譜技術(shù)，利用遺傳性耳聾基因篩查試劑盒對血液樣品進行遺傳性耳聾基因篩查，只需一次反應(yīng)即可同時檢測上述4個遺傳性耳聾基因20個突變熱點位點的突變情況，具有低成本、高靈敏度、高通量、高效率的特點。

表4 遺傳性耳聾基因檢測的內(nèi)容

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MALDI-TOF如今已經(jīng)誕生30多年，通過“軟電離”技術(shù)與飛行時間質(zhì)譜的結(jié)合，為生命科學(xué)領(lǐng)域提供了全新的分析方法。融智生物推出的擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的新一代高通量、高靈敏度飛行時間質(zhì)譜QuanNUA，更是引領(lǐng)MALDI-TOF技術(shù)進入“寬譜+定量”的新時代。

融智生物基于QuanNUA核酸分型質(zhì)譜開發(fā)的MPE遺傳性生物耳聾基因檢測方法，完美的結(jié)合了PCR反應(yīng)的便利性和MALDI-TOF質(zhì)譜技術(shù)的高通量、高分辨率、高靈敏度、低成本優(yōu)勢，完美解決臨床檢測需求。

融智生物遺傳性耳聾基因檢測項目優(yōu)勢：

1）檢測成本低、性價比高；

2）檢測內(nèi)容全面：涵蓋中國人群的大部分熱點位點及罕見位點；

3）檢測速度快、通量高：8小時可完成全流程，每天可完成3000份樣品檢測；

??4）高靈敏度：單堿基分辨率，檢測結(jié)果準(zhǔn)確；

5）商業(yè)供應(yīng)和售后響應(yīng)穩(wěn)定及時：擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的儀器設(shè)備、試劑耗材、應(yīng)用軟件；檢測試劑100%及時供應(yīng)、2小時售后服務(wù)響應(yīng)24小時達到現(xiàn)場；

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圖2 實驗流程示意圖

融智生物MPE方法原理如下：

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圖3 融智生物MPE方法原理示意圖

QuanNUA核酸分型質(zhì)譜系統(tǒng)，是融智生物自主研發(fā)的新一代高分辨率寬譜定量飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOFMS），具有寬質(zhì)量范圍(10-1,000,000Da)檢測能力，在高、低質(zhì)量區(qū)均能達到高分辨率。

QuanNUA核酸分型質(zhì)譜系統(tǒng)，完美的結(jié)合了PCR反應(yīng)的便利性和MALDI-TOF質(zhì)譜技術(shù)的高通量、高分辨率、高靈敏度、低成本優(yōu)勢，是一款專為臨床定制的、多基因多位點基因分型的高性價比平臺，完美解決臨床檢測需求。QuanNUA核酸分型質(zhì)譜系統(tǒng)擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的儀器設(shè)備、試劑耗材、應(yīng)用軟件，穩(wěn)定保障檢測試劑100%及時供應(yīng)，2小時售后服務(wù)響應(yīng)24小時達到現(xiàn)場。

QuanNUA核酸分型質(zhì)譜系統(tǒng)的技術(shù)原理：用一定強度的激光照射樣本與基質(zhì)形成的共結(jié)晶薄膜，基質(zhì)從激光中吸收能量而汽化，并迅速降解,使樣本分解吸附，基質(zhì)和樣本之間發(fā)生電荷轉(zhuǎn)移從而使樣本分子發(fā)生電離；帶有電荷的樣本分子在電場作用下加速飛過飛行管道，因為離子的質(zhì)荷比與離子的飛行時間呈正比，所以不同質(zhì)量的離子因達到檢測器的飛行時間不同而被檢測，以離子峰為縱坐標(biāo)、離子質(zhì)荷比為橫坐標(biāo)形成特征性的質(zhì)量圖譜，進行實現(xiàn)對不同質(zhì)荷比的物質(zhì)進行區(qū)分和鑒定。

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圖5 QuanNUA核酸分型質(zhì)譜系統(tǒng)技術(shù)原理示意圖

附，基質(zhì)和樣本之間發(fā)生電荷轉(zhuǎn)移從而使樣本分子發(fā)生電離；帶有電荷的樣本分子在電場作用下加速飛過飛行管道，因為離子的質(zhì)荷比與離子的飛行時間呈正比，所以不同質(zhì)量的離子因達到檢測器的飛行時間不同而被檢測，以離子峰為縱坐標(biāo)、離子質(zhì)荷比為橫坐標(biāo)形成特征性的質(zhì)量圖譜，進行實現(xiàn)對不同質(zhì)荷比的物質(zhì)進行區(qū)分和鑒定。

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